1  粗多糖的测定

1.1  原理：样品中多糖经沸草酸水溶液提取，乙醇沉淀分离后，去除其他可溶性糖及其杂质，在硫酸沸水浴中加热脱水生成羟甲基呋喃甲醛（羟甲基糖醛）再与蒽酮缩合生成蓝色化合物，以比色法求其含量。

1.2  仪器

1.2.1  离心机：4000r/min

1.2.2  离心管：60mL

1.2.3  全玻璃磨口回流装置（250mL）

1.2.4  721分光光度计

1.3  试剂

1.3.1  葡萄糖标准液：准确称取1.000g经过98～100℃干燥至恒重的分析纯葡萄糖，加水溶解后以水稀释至1000mL，此溶液1mL含葡萄糖1mg，用前稀释10倍，1mL含葡萄糖0.1mg。

1.3.2  0.2%蒽酮硫酸溶液：称取0.2g蒽酮置于烧杯中，缓缓加入100m浓硫酸，现用现配。

1.4  样品处理：准确称取约2g（精确至0.001g）均匀研碎样品粉末，加50mL3%草酸溶液于250mL烧瓶中，上接冷凝管，在沸水浴中回流2h，冷却后加水定容至100mL，过滤，取滤液10mL于60mL离心管中，加无水乙醇50mL，摇匀，4000r/min离心10min，弃去上清液，加10mL90℃热水冲洗离心管中沉淀物，加50mL无水乙醇，摇匀，以4000r/min离心10min，弃去上清液，加热水分次溶解沉淀并定容至100mL，作为待测溶液。

1.5  标准曲线的绘制：准确吸取1mL含0.1mg葡萄糖标准溶液0.0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于10mL具塞比色管中，用水补足至1.0mL（相当于0.00、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mg葡萄糖），加入5mL蒽酮试剂，充分混匀，一起浸入沸水浴中，准确沸10min，用流水冷却，20min后于620nm波长处测定吸光度值并绘制标准曲线。

1.6  样品测定：准确吸取样品待测液1.0mL于10mL具塞比色管中，加入5mL蒽酮试剂，其他操作步骤同1.5项标准曲线的绘制，根据测吸光度值从标准曲线上查得糖质量，计算样品中多糖含量。

1.7  结果计算

m₁

X = ————————————×100

10    1.0

m×——×———×1000

 100   100

式中：

X—样品中粗多糖（以葡萄糖计），g/100g；

m₁­—由标准曲线上查得样液中含糖质量，mg；

m—样品质量，g。

少年儿童、孕妇、乳母